產品信息
CD4+ T 細胞（CD4+ T Cells）
PB01
凍存株 1 管，2 X 10
6
cells/管
陰選
產品描述
? 使用非接觸的免疫磁珠標記單個核細胞，從中分離獲得 CD4+ T 細胞。
? 本產品經過細胞數量、細胞純度、細胞活力、細菌和真菌檢測，提供細胞流式鑒定圖和完整的
質量檢測報告，保證產品質量。
產品保存
? 收到產品后，檢測產品是否有破損及是否處于凍存狀態。若處于凍存狀態，立即放置于-80℃
的深低溫冰箱（＜1 個月）或液氮（＞1 個月）中保存；若出現問題，請及時拍照記錄并向廠
家反饋情況再進行廢棄。
? 收到產品后，請按要求放置至少 3d 后再進行復蘇操作，以保證產品的穩定性和細胞活率。
注意事項
★ 在無菌條件下處理本產品；
★ 儲存于液氮中的凍存管有爆管的可能，請仔細閱讀說明書中的復蘇流程；
★ 本產品僅限科研使用，請勿用于醫藥、臨床診斷或治療；
★ 請按照受污染的生物標本原則來處理本產品，以保證產品的安全性。
培養條件
完全培養基：IMDM/DMEM/RPMI-1640＋10%滅活的 FBS
產品復蘇
1. 開啟水浴鍋至 37℃, 提前預熱完全培養基。
2. 從液氮中取出細胞，用 70%酒精棉球擦拭凍存管表面，隨后在生物安全柜中適度擰松管蓋，平衡
氣壓后，再擰緊。
3. 在 37℃水浴鍋中快速解凍細胞，不停晃動并查看，當凍存管中只剩少量冰晶時即可停止。
a) 盡可能避免水沒過凍存管帽，建議用鑷子夾住凍存管連續晃動，以降低污染的風險。
b) 2min 內務必完成細胞復蘇過程，時間過久會導致復蘇細胞活率較差。
4. 待細胞凍存液完全解凍，用 70%酒精棉擦拭凍存管的外壁后拿入生物安全柜，開蓋后吹勻細胞懸
液，取 10μL 用于細胞計數。計數方法：按照 1:1 與臺盼藍混合后使用血球計數板計數，或按照
計數儀使用說明進行計數，記錄細胞活力和細胞密度。
5. 將剩余細胞懸液轉移至 50mL 離心管中，并用 1mL 完全培養基潤洗凍存管，收集殘留的細胞。
6. 緩慢滴加 15-20mL 完全培養基至高濃度細胞懸液中（約 1mL/秒），同時晃動離心管，完全混勻
后在室溫下離心 300g、15min。
7. 離心后轉移上清到新的離心管中，暫時不要丟棄，以免細胞未完全收集而造成較大損失。
8. 按需加入新鮮的完全培養基重懸細胞，并再次計數，用于后續實驗。
若需再次洗滌細胞，則重復步驟 6-8，每次洗滌會造成 10-15%的細胞損失。
若離心后細胞數量低于預期，請將步驟 7 的上清液離心 500g、15min，再次收集。
使用過程中有任何問題請及時與我們聯系！